冬虫夏草中腺苷的检测方法

腺苷是一种内源性核苷,可通过磷酸化直接进入心肌产生腺苷,参与心肌能量代谢,还可参与扩张冠状动脉和增加血流。腺苷对心血管系统和许多其他系统和组织有生理作用。腺苷是合成三磷酸腺苷(ATP)、腺苷和腺苷的重要中间体。


通过市场调查和试验,发现冬虫夏草造假现象严重,冬虫夏草是麦角科真菌,寄生在冬虫夏草科幼虫上的冬虫夏草(Cordycepssinensis,Cordycepssinensis)和幼虫身体复合体对免疫系统调节功能、抗肿瘤、抗疲劳等有多种作用。冬虫夏草是一种中药材。由于其价格高,假冒伪劣产品在市场上继续出现。


冬虫夏草中腺苷的测定(高效液相色谱法)


一、实验原则


根据"中华人民共和国药典"第一部分,在2010年版"冬虫夏草"下,对样品进行粉碎筛选,用90%甲醇溶剂提取,然后用高效液相色谱法(HPLC)测定。


根据"药典"的规定,确定其真假利弊。


二.仪器和试剂


GB/T1397-1988热科学高效液相色谱紫外检测器AS 3120超声波发生器HH-4数字显着性


温水浴锅,甲醇作色谱纯试剂,实验水为超纯水.


三.试验方法


1.提取


取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称重,放入塞锥瓶,精密度加90%甲醇10毫升,


填塞,摇匀,称重,加热,再回流30分钟,冷却,再称重,用90%的甲醇来弥补减重。


摇好,过滤,取滤液,拿去。


2.色谱条件


色谱柱:热学C18(250×4.6mm,粒径5μm);


检测波长:260 nm;


流动相:磷酸盐缓冲液(pH6.5)~甲醇(85:15)为流动相;


速度:1.0ml/min


注射体积:10μL.


药典"要求本品含有不少于0.010%的腺苷(C10H13N5O4)。


图1.腺苷标准的液相色谱


图2.冬虫夏草中熊果苷的液相色谱测定


四.结果的计算和评价


化学分析和测试中心采用外部标准方法计算腺苷含量。


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